淺析四種葉綠素測定方法，葉綠素含量是植物生長環(huán)節(jié)中一個重要的生理指標(biāo)，由于其對周圍環(huán)境很敏感，并與植物的光合作用、營養(yǎng)吸收等密切相關(guān)，被廣泛作為植物生長的常規(guī)測定指標(biāo)項目。葉綠素含量的測定方法有多種，在國際上以傳統(tǒng)的Arnon法（也稱研磨法）應(yīng)用Z為廣泛。但該法需要把植物材料研磨并經(jīng)轉(zhuǎn)移、過濾或離心處理，不僅工作量大，而且不可避免地使試驗人員較長時間與揮發(fā)于空氣中的試劑相接觸，對人體損害較大。近年來，直接浸取法受到重視，用不同配比的混合液對葉綠素進(jìn)行提煉，證明了用混合液提煉的可行性，并對傳統(tǒng)的Arnon法進(jìn)行了改進(jìn)，將樣品冷凍處理后，用50℃丙酮靜置提煉并進(jìn)行測定，極大提高了工作效率。
（1）研磨法：稱取0.5g樣品于研缽內(nèi)，加入少量CaCO3和5mL80%的丙酮，將材料充分研磨細(xì)碎直至變白（約5min），轉(zhuǎn)移至10mL具塞離心管中，定容至刻度，搖勻后置于4℃冰箱中靜置12h,離心10min（2000r/min），取上清液測定。
（2）直接浸取法：稱取0.5g樣品放入10mL具塞離心管中，用80%丙酮定容至刻度，于暗柜中靜置72h浸取，取上清液測定。
（3）樣品冷凍后用50℃提取液提煉法：稱取0.5g樣品于10mL具塞離心管中，置冰箱中冷凍2h,取出后加入10mL在水浴鍋中加熱至50℃的80%丙酮，充分振搖后于暗柜中靜置4h,取上清液測定。
（4）葉綠素計法：葉綠素計是所有方法中Z快捷的，你只需手持葉綠素計，將葉片插入儀器的感應(yīng)部位，然后合上測量探頭即可。應(yīng)用于這種測定的儀器又被叫做便攜式葉綠素儀，因為該葉綠素計擁有小巧的機(jī)身，僅200g的重量，可以方便地裝入口袋并帶到現(xiàn)場進(jìn)行測量。
在以上幾種測定方法中，直接浸取法提煉效果Z好，但耗時長，傳統(tǒng)研磨法葉綠素的損失較大，冷凍后用50℃提取液提煉法操作簡便且提煉速度較快，在提煉率和穩(wěn)定性方面均顯示良好的優(yōu)越性。冷凍后用50℃提取液提煉法的Z優(yōu)試驗條件為將試驗材料冷凍1h后，靜置提煉3h.而葉綠素儀法，則相較于其他三種化學(xué)方法，更加快速方便。而且用SPAD-502測定葉綠素含量時，不會對葉片造成損傷，這也是使用葉綠素計的另一大好處。因為你不需要摘下葉片，直接用儀器夾住葉片測定即可，這樣就可以在作物的成長環(huán)節(jié)中全程對特定的葉片進(jìn)行監(jiān)測，進(jìn)而獲得更科學(xué)的分析結(jié)果
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